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山茱萸现代药理研究
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山茱萸现代药理研究

文章出处:西安雨诺生物工程有限公司发表时间:2017-03-15 08:19:47浏览次数:

    山茱萸具有补益肝肾,涩精固脱等作用。长用于眩晕耳鸣,腰膝酸痛,阳痿遗精,遗尿尿频,崩漏带下,大汗虚脱等。现代药理研究表明,山茱萸具有抗菌消炎、降压降糖、抗癌、抗氧化等作用。

1.抗菌作用 果实煎剂在体外能抑制金黄色葡萄球菌的生长,而对大肠杆菌则无效。煎剂(1:1)对志贺氏痢疾杆菌的抑菌圈,直径可达13-18mm(平板环杯法)。从山茱萸鲜果肉中可得一黑红色酸味液体,对伤寒、痢疾细菌有抑制作用。水浸剂(1:3)在试管内对堇色毛癣菌有不同程度的抑制作用。


2.降血糖作用 2.1对正常大鼠血糖的影响 远交系Wistar雄性大白鼠,体重150-200g,36只均分4组。1组为对照组,其余3组为药物组,分别5、7.5、15g/(kg,d)药物(山茱萸成熟果肉。碾细后用70%乙醇回流提取,制浸膏1ml(相当于3.5g生药)ig。药物组与对照组血糖值无明显差异。另曾以50g/kg药物对大鼠ig1周,结果也未见对正常大鼠血糖值有明显影响。


2.2对肾上腺素性大鼠高血糖的影响 大鼠24只,均分3组,禁食2小时后,正常对照组和造型对照组ig给水,给药组ig给山茱萸7g/kg。给药后1小时,造型对照组大鼠sc生理盐水;造型对照组和给药组大鼠sc肾上腺0.25mg/kg。注射后135分钟取血测定血糖。可见山茱萸有明显的对抗肾上腺素性高血糖的作用。


2.3对四氧嘧啶性大鼠高血糖、肝糖原、甘油三酯和胆固醇的影响大鼠24只,均分3组。1组为正常对照组,另2组于大鼠舌下iv30mg/kg的四氧嘧啶生理盐水溶液,其中一组每日ig山茱萸7g/kg。实验结果表明,山茱萸对四氧嘧啶性糖尿病大鼠的高血糖有明显影响(P<0.05),有一定的升高大鼠肝糖原的作用,但对甘油三酯和胆固醇无明显影响。


2.4对偶氮磺胺性大鼠糖尿病的影响 采用Wistar系雄性大白鼠。动物停食45小时后按50-65mg/kgiv偶氮磺胺诱发糖尿病。将八味地黄丸制成相应干浸膏剂和粉剂,其它组分则制成粉剂。山茱萸除制成乙醚提取剂(COE)并且进一步分离出其他的3个亚组分:COEfr-1、COE一fr-2、COE-rf-3。然后,再从COE-fr-2中制得三种结晶一鱼肝酸油、乌索酸和2-a-羟乌索酸,前两种供实验使用,山茱萸及八味地黄丸的粉剂为2g/kg,COE1g/kg,COE的3个亚组分及鱼肝油酸和乌索酸分别为0.5g/kg。给药的方法是:动物静脉注射偶氮磺胺(Streptozotocin)后lh开始po给药,以后每天2次,共给药6次,于最后1次给药后3小时时从腹腔大静脉取血进行血糖测定。同时测定尿糖以及动物20小时的饮水量和尿量。实验结果表明,以八味地黄丸的粉剂和其中的山茱萸抗糖尿病的效果最为明显,山茱萸粉剂给药后,动物20小时的饮水量为23.3±2.8,与对照组(46.4±50)相比,差异非常显着(P<0.0001=。血糖(mg/dl)及尿糖含量(mg/20小时尿)分别为393.3±28.7和2553.0±205.1与对照组相比(470.0±21.3和4733.7±389.5)具有明显差异前者P<0.05,后者P<0.0001=。八味地黄丸粉剂的降血糖和尿糖的作用也非学明显,而其干浸膏则无明显效果。在山茱萸的乙醚提取剂中,尤其COE-fr-2的活性最强。COE-fr-2给药后,动物20小时的饮水量和尿量分别为13.8±3.4和13.5±1.9,与对照组相比(50.0±3.2和36.7±3·0)差异均非常显着(P<0.001=,血糖及尿糖含量分别为227.2±25.3和978.2±167·8与对照组相比(403.3±36.6和2916.8±55.4),均具有显着的差异(前者P<0.05,后者P<0.0001=,另外,COE和COE-fr-l也有明显的降尿糖作用,而COE和COE-fr-2有降低动物体重的趋势。对从COE-fr-2中分离制得的鱼肝酸油和乌索酸,虽然两者均可显着地减少动物20小时的饮水量和尿量,但只有乌索酸可以明显地降低血糖和尿糖。乌索酸给药后,动物的血糖和尿糖含量分别为294.2±37.2和1175.5±249.2,与对照组相比(513.2±35.4和3013.3±404.2)具有非常显着的差别(P<0.0001)2.5对高血糖大鼠全血粘度的影响 四氧嘧啶性糖尿病大鼠ig山茱萸7g/kg1周后,尾静脉取血测定血糖。再用40mg/kg戊巴比妥钠溶液麻醉,肝素抗凝,腹主动脉取血,测定全血粘度。


2.6对高血糖大鼠血小板聚集的影响 山茱萸7h/kg,末次ig四氧嘧啶性糖尿病大鼠后2小时,以3.8%枸橼酸钠9:l比例抗凝,腹主动脉取血,制备富血小板和贫血小板血浆,用ADP为致聚剂,测定药物对血小板聚集功能的影响。结果山茱萸组的血小板抑制聚集率为44.6%(P<0.00013. 对免疫系统的作用3.1对免疫器官重量的影响 雄性ICR小鼠40只,随机分为4组,实验组连续5dig山茱萸10.20g/kg(水煎剂);对照组每天给予同样量水,阳性对照组于d3开始,连续3dip环磷酰胺50mg/kg。末次给药后24h,放血处死动物,摘取小鼠胸腺、脾脏及肝脏并称其湿重计算各脏器的指数。山茱萸降低小鼠的胸腺指数,对肝脏、脾脏影响不显着。


3.2对碳性粒廓清速率的影响取雄性ICR小鼠,山茱萸及环磷酰胺的给药剂量及方式同上。末次给药后24h,按文献方法计算小鼠的廓清指数(K)及校正廓清指数(a)。结果不同剂量的山茱萸组K值均明显低于对照组。


3.3对小鼠血清抗体的影响3.3.1对溶血素抗体的影响 雄性NIH小鼠,给药组于绵羊红细胞(SRBC)致敏前第2d始,连续5dig山茱萸5.10g/kg,阳性对照组ip环磷酰胺25mg/kg,每次给药后24h,按比色法测定并计算样本的HC50。由表6可见,山茱萸10g/kg明显升高小鼠血清溶血素抗体含量,山茱萸5g/kg作用不显着。


3.3.2对抗体IgG含量的影响 BALB/C小鼠,雌雄兼用,山茱萸的给药剂量同上,阳性对照组于实验组给药d4开始,连续2dip环磷酰胺100mg/kg。末次给药后24h,小鼠眼眶采血,分离血清,按琼脂单向扩散法测IgG含量,IgG含量,以沉淀环直径表示。不同剂量山茱萸匀能显着升高小鼠血清IgG含量。


3.4对SRBC所致迟发型足垫反应的影响 取雄性昆明种小鼠,实验组于SRBC致敏前1d给药,山茱萸的给药剂量及方式同3,末次给药后lh抗原攻击,24h后测小鼠左右足垫的厚度差及重量差,结果山茱萸5,10g/kg均抑制SRBC所致小鼠迟发型足垫肿胀。


3.5对DNCB所致接触性皮炎的影响3.5.1攻击前给药对接触性皮炎的影响 取雌性NIH鼠,实验组于DNCB致敏后d6开始,连续5dig山茱萸10,20d/kg,末次给药后6h,以DNCB涂于小鼠右耳进行攻击,16h后剪下两耳,以直径9mm打孔器打下耳片,以右耳的增重表示接触性皮炎的程度,结果不同剂量山茱萸对小鼠的耳廓肿胀均表现明显的抑制作用。


3.5.2攻击后给药对接触性皮炎的影响 雄性NIH小鼠56只,随机分为7组,实验方法同文献,于DNCB致敏后dl0,给药组于抗原攻击后不同时间ig山茱萸20g/kg。山茱萸于攻击后3-15小时给药均能明显抑制DNCB所致小鼠接触性皮炎。


山茱萸总甙体内外用药,对小鼠均为免疫抑制作用;熊果酸体外试验能杀死培养的小鼠淋巴细胞,使失去淋转,IL-2生成和LAK细胞产生的能力,但如腹腔注射熊果酸,对小鼠的上述指标均明显提高。


4.抗休克作用4.1对颈动脉血压的影响 取1.5-3.5kg健康家兔,雌雄不拘,随机分为二组,甲组为实验组,乙组为对照组。在2%普鲁卡因局麻下行颈动脉剥离,插管,接Rm-600型四导生理记录仪,耳静脉注射312u/(m1,kg)肝素。然后开始股动脉缓慢放血,使血压降到50mmHg以下。由于家兔的代偿机能,停止放血后血压可自动回升。若回升较高时,则再次放血,使血压维持在60mmHg以下,持续lh,并记录休克期各项观察指标数值,然后甲组给1g/ml山茱萸注射液颈部皮下浅静脉点滴,给药速度为36滴/min;乙组给等量生理盐水静脉点滴。山茱萸注射液pH为7.68,生理盐水pH为7.5。30分钟后再取标本,并记录治疗后各项观察指标数值,终止观察。实验结果发现:甲组由休克期平均49.73±7.25mmHg上升为87.64±7.13mmHg,上升幅度为39.43±9.97mmHg;乙组由休克期平均55.46±8.57mmHg上升为68.61±17.6mmHg,上升幅度为13.15±12.12mmHg。两组有显着差异,t=61.8,P<0.001。


4.2对血压心搏波振幅的影响 上述实验的甲组由休克期平均1.42±0.7mm增大为4.03±1.11mm,增大幅度为2.61±0.72mm;乙组由体克期平均1.88±0.9mm增大至2.35±0.87mm,增大幅度为0.57±0.93mm。两组有显着差异,t=5.36,P<0.001。


5.抑制炎症反应作用5.1抑制小鼠腹腔毛细血管通透性雄性昆明种小鼠,体重18-22g。阳性对照组每日ig阿斯匹林50mg/kg;给药组每日ig山茱萸5,10g/kg(水煎剂含生药1g/ml),连续5d;空白对照组每日给予等量的水,末次给药后lh,各鼠尾iv0.5%Evans蓝5ml/kg,5min后ip0.7%醋酸10ml/kg,间隔30min后将小鼠放血处死,用蒸馏水多次冲洗腹腔,收集冲洗液并稀释至10ml放置lh,用751型分光光度计610nm处比色,由Evans蓝吸收的标准曲线染料渗出量,结果对照组、阿斯匹林组、山茱萸5.10g/kg组染料渗出量(ug/ml)分别为91±1.6,4.9±2.5(P<0.01),5.3±2.0(P<0.01),5.5±2.8(P<0.01)(x±S,n=10)。可见不同剂量山茱萸对醋酸引起的大鼠腹腔毛细血管通透性增加均有明显抑制作用。


5.2抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀雄性昆明种小鼠,体重18-22g,给药组连续5dig山茱萸10.20g/kg,末次给药后1h,将二甲苯30ul涂于小鼠右耳廓,左耳廓作对照,2小时后剪下耳廓并以直径9mm打孔器取下耳片,称重。结果对照组、山茱萸10.20g/kg组小鼠左右耳廓重量差(mg)分别为18.2±4.5,9·9±4.5(P<0.01),11.3±4.3(P<0·01),(n=10)。表明山茱萸显着抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀。


5.3抑制致炎剂引起的大鼠足垫肿胀 雄性SD大鼠,体重120-160g,阳性对照组、给药组分别连续5dig阿斯匹林50mg/kg及山茱萸5g/kg,末次给药后l小时,于大鼠右后足垫scl%角叉菜胶成新鲜蛋清0.1ml,致炎后每小时以千分卡测量一次足垫肿胀度(mm),结果山茱萸5g/kg对蛋清所致肿胀具有明显抑制作用,而对角叉菜胶所致足垫肿胀仅在1小时时抑制作用显着。


5.4抑制大鼠棉球肉芽组织增生 雄性Wistar大鼠,体重150-220g,乙醚麻醉,于两侧前肢腋窝下各埋植20mg重消毒棉球一个,阳性对照组、给药组分别连续sc氢化可的松10mg/kg及ig山茱萸5,10g/kg,大鼠于d8放血处死,剥离肉芽组织,80℃烘烤3小时后称重,并同时取各鼠胸腺、肾上腺称重。由表12可见山茱萸明显抑制大鼠棉球肉芽组织增生,对胸腺及肾上腺重量无显着影响。


5.5降低大鼠肾上腺内抗坏血酸含量 取肉芽肿试验所用大鼠右侧肾上腺,制成匀浆后按2,4一二硝基苯肼显色法测定其中抗坏血酸含量。山茱萸5,10g/kg均使大鼠肾上腺内抗坏血酸含量明显降低。


5.6对大鼠炎症组织内PGE含量的影响 雄性SD大鼠,体重150-180g。给药组、阳性对照组分别连续5dig山茱萸10g/kg或消炎痛50mg/kg,末次给药后30分钟,于各鼠右后足垫scl%角叉菜胶0.1ml,3小时后处死,将右后足自踝关节上lcm处剪下称重,剥皮后置于5ml生理盐水中浸泡lh,取上清液0.15ml加入0.5mol/L氢氧化钾甲醇液1ml,在50℃水浴异构化20min,加甲醇2.5ml,于278nm处测定紫外吸收值(△A),以每克炎症组织相当的吸收值表示PGE含量,结果山茱萸10g/kg对大鼠致炎足重量及其PGE含量均无明显影响。


6.抗癌作用 取健康的小白鼠接种腹水癌细胞液0.1ml。7-8d后生长癌液较多,抽出癌液加一滴至玻璃片上,并加一滴20%山茱萸煎剂及一滴伊红台氏溶液,在显微镜下观癌细胞的死亡情况,如被杀死则细胞染成红色,未死则仍为无色透明状。对照的正常细胞为唾液腺细胞和精巢细胞。实验结果表明,山茱萸能够杀死全部癌细胞;精巢细胞亦有同样作用,但对唾液腺细胞仅有小部分被杀死。


7.其他作用 早年曾报告,流浸膏对麻醉犬有利尿作用,且能使血压降低,对正常家兔血糖无影响。上述酸性液,对蛙、小鼠、大鼠、兔的毒性不大,对体重和血象无影响,可致兔胃粘膜轻度充血,但对兔结膜无作用。山茱萸甙毒性很低,不溶血,但有较弱的兴奋副交感神经的作用, 本品具抗氧化作用。


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